5種DNA染色常見染料和可視化DNA

在用凝膠電泳分離材料後,有幾種不同的染色劑可用於可視化和拍攝DNA 。 在許多選擇中,這五種菌株是使用最廣泛的溴化乙錠最常見的開始。 在處理這個過程時,重要的是不僅要了解菌株之間的差異,還要知道固有的健康風險。

  • 01溴化乙錠

    溴化乙錠很可能是用於可視化DNA的最著名的染料。 該染料可以用於凝膠混合物, 電泳緩衝液中或在運行後染色凝膠。 染料的分子粘附在DNA鏈上,並在紫外線下發出熒光,從而準確顯示出凝膠中帶的位置。 儘管有其優點,但缺點是溴化乙錠是一種潛在的致癌物質,所以必須小心處理。 由於使用這種凝膠的潛在健康風險,已找到替代品。
  • 02 SYBR黃金

    SYBR Gold染料可用於染色雙鍊或單鏈DNA,或染色RNA。 SYBR Gold是溴化乙錠首次進入市場的替代品之一,它被認為比溴化乙錠更敏感。 一旦染料與核酸結合,該染料展現出1000倍的紫外熒光。 然後它可以穿透厚而高百分比的瓊脂糖凝膠,並可用於甲醛凝膠。

    由於未結合分子的熒光很低,所以不需要脫色。 許可證持有人Molecular Probes(自推出SYBR Gold以來)開發並銷售了更安全的溴化乙錠替代品SYBR Safe和SYBR Green。

  • 03 SYBR Green

    SYBR Green I和II染色劑(再次由Molecular Probes銷售)針對不同目的進行了優化。 因為它們與DNA結合,它們仍然被認為是潛在的誘變劑,因此應該小心處理它們。 SYBR Green I對雙鏈DNA更敏感,而SYBR Green II則最適合與單鏈DNA或RNA一起使用。 像流行的溴化乙錠染色劑一樣,這些高度敏感的污漬在紫外線下發出熒光。
  • 04 SYBR安全

    SYBR Safe的設計是為了更安全地替代溴化乙錠和其他SYBR染色劑。 它不被視為有害廢物,通常可以通過常規下水道系統(即下水道)進行處理,因為毒性測試表明沒有急性毒性。 測試還表明,敘利亞倉鼠胚胎(SHE)細胞,人淋巴細胞,小鼠淋巴瘤細胞和AMES測試中幾乎沒有遺傳毒性。 該染色劑可以與藍光透照器一起使用,對可視化的DNA造成較小的損傷,並且為以後的克隆提供更好的效率。
  • 05伊娃格林

    Eva Green是一種綠色熒光染料,與其他染料相比,已被發現可抑制PCR的程度較低。 這對於定量實時PCR等應用非常有用。 如果您使用低熔點凝膠回收DNA,這也是一個不錯的選擇。 它在高溫下非常穩定,自身熒光很低,但與DNA結合時熒光很強。 伊娃格林也被證明具有非常低或沒有細胞毒性或致突變性。