如何製作這種免疫組織化學染色緩衝液
磷酸鹽緩衝液（PBS）是一種常用於免疫組織化學（IHC）染色的緩衝液，常用於生物學研究。 PBS是含有磷酸氫鈉，氯化鈉以及在某些情況下含有氯化鉀和磷酸二氫鉀的水基鹽溶液。
免疫組化染色
免疫組織化學是指通過使用與生物組織中的抗原特異性結合的抗體的原理，檢測組織切片細胞中的抗原如蛋白質的過程。
免疫熒光染色是第一種免疫組織化學染色方法。
由於抗原 - 抗體結合反應，當使用熒光染料與抗體綴合時，抗原變得可見。當在熒光顯微鏡下通過激發特定波長的光來激活時，該過程發生。
溶液的滲透壓和離子濃度與人體相同 - 它們是等滲的。
PBS的食譜
您可以通過多種方式準備PBS。 有多個公式。 其中一些不含鉀，而另一些含有鈣或鎂 。
這個配方相對容易。 它用於10X PBS儲備溶液（0.1M）。 但是，您也可以製作1X儲備溶液，或者從10X配方開始稀釋至1X。
整個過程大約需要10分鐘。
還提供了添加Tween的選項。
您需要製作PBS緩衝液
- 磷酸二氫鈉（無水）
- 磷酸氫二鈉（無水）
- 氯化鈉
- 秤和稱重船
- 磁力攪拌器和攪拌棒
- 經過校準的pH探頭和用於調節pH的適當溶液
- 1L容量瓶
- 吐溫20（可選）
如何製作磷酸鹽緩衝鹽水（PBS）
稱取10.9g無水磷酸氫二鈉（Na 2 HPO 4），3.2g無水磷酸二氫鈉（NaH 2 PO 4）和90g氯化鈉（NaCl）。
僅在1L蒸餾水中溶解。
調整pH值至7.4，使溶液達到最終體積1L。
使用前稀釋10倍，必要時重新調整pH值。
您可以通過向1L溶液中加入5mL吐溫20來製備含有0.5％吐溫20的PBS溶液。
製作PBS緩衝液的技巧
製成PBS溶液後，將緩衝液儲存在室溫下。
非無水試劑可以替代，但您必須重新計算每種試劑的適當質量以適應添加的水分子。
磷酸鹽緩衝鹽水（PBS）的用途
磷酸鹽緩衝鹽水俱有許多用途，因為它對大多數細胞是等滲的和無毒的。 它可以用來稀釋物質，它通常用來沖洗細胞容器。 例如，PBS可以用作乾燥生物分子的各種方法中的稀釋劑，因為其中的水分子將圍繞物質蛋白質構成。 它將被“乾燥”並固定在固體表面上。
pH保持穩定且一致以防止細胞破壞。
與物質結合的水薄膜防止變性或其他構象變化。 碳酸鹽緩衝液可用於相同的目的，但效果較差。
在測量橢圓光度法中的蛋白質吸附時，PBS也可用於獲取參考光譜。