這些緩衝液可用於接近中性pH的生物應用
磷酸的三個pKa值（來自CRC化學和物理手冊）為2.16,7.21和12.32。 如此處所示，磷酸一鈉及其共軛鹼，磷酸二鈉通常用於生成pH值約為7的緩衝液，用於生物應用。
製作這個緩衝區比製作TAE和TBE緩衝區要困難一些。 然而，這並不是非常困難。 簡單的平均。 它應該需要大約10分鐘鞭打這個緩衝區。 就是這樣。
1.確定緩衝區屬性
在製作緩衝液之前，您應該先了解您想要的摩爾濃度，製備的體積以及所需的pH值。 大多數緩衝液在0.1M和10M之間的濃度下效果最好。pH應該在酸/綴合物鹼pKa的1pH單位內。 為了簡單起見，此示例計算將用於1升緩衝液。
2.確定酸與鹼的比例
使用Henderson-Hasselbalch公式（如下）來確定製作所需pH值的緩衝液所需的酸鹼比。 使用最接近所需pH值的pKa值，該比例將指與pKa相對應的酸鹼共軛對。
HH等式：pH = pKa + log（[鹼] / [酸]）
對於pH 6.9的緩衝液，[鹼] / [酸] = 0.4898
替代[Acid]並解決[Base]
所需的緩沖劑的摩爾濃度是[酸] + [鹼]的總和。
對於1M緩衝液，[鹼] + [酸] = 1和[鹼] = 1- [酸]
通過將它代入比例公式，從第2步開始：
[酸] = 0.6712摩爾/升
解決[Acid]
使用公式：[Base] = 1 - [Acid]，可以計算出：
[基] = 0.3288摩爾/升
3.混合酸和共軛鹼
使用Henderson-Hasselbalch方程計算緩衝液所需的酸鹼比例後，使用正確量的磷酸一鈉和磷酸二鈉，準備1升以下的溶液。
4.檢查pH值
使用pH探頭確認緩衝液的正確pH值。 如有必要，使用磷酸或氫氧化鈉（NaOH）稍微調整。
5.更正音量
一旦達到所需的pH值，將緩衝液的體積調至1升。 然後根據需要稀釋緩衝液。 可以將該相同的緩衝液稀釋以產生0.5M，0.1M，0.05M或任何兩者之間的任何緩衝液。
6.緩衝區提示
請記住，pKa不容易測量到一個確切的值。 來自不同來源的文獻中可能存在略微不同的值。
7.你需要什麼
為了製作緩衝液，你需要三種物質，其餘的材料是設備。 這些物質是磷酸一鈉，磷酸二鈉和磷酸或氫氧化鈉以調節pH。
您還需要一台pH計和探頭以及適當的實驗室器具。 這包括容量瓶，刻度量筒，燒杯和攪拌棒。
最後，你需要一個攪拌電爐。