凍乾或冷凍乾燥是一個簡短的實驗室程序
凍乾基礎知識
長時間儲存細菌,真菌,酵母或其他微生物培養物的最佳方法之一是使用冷凍乾燥過程。 這個簡短的實驗室程序可以用任何商業上可用的冷凍乾燥機進行,這將保留您的培養物收集。 因為凍乾是最複雜和最昂貴的干燥形式,所以這個過程通常局限於具有高價值的微妙的熱敏材料。 通常不凍結的物質通常可以凍乾,因此冷藏是不必要的。
這個過程可能需要三個小時,長達24小時,不包括文化的發展時間。
凍乾的分步過程
首先,在LB或其他適當的營養瓊脂平板上培養微生物的過夜培養物或草坪。
接下來,提前通過高壓滅菌處理來製備無菌壓蓋瓶,並將瓶蓋(橡膠塞)鬆散地放置在頂部。 高壓滅菌前,將帶有培養物標識的紙張標籤放在試管內。 或者,使用設計用於無菌的帽子 。
加入4mL凍乾緩衝液到平板上。 如有必要,細胞可以使用無菌玻璃棒懸浮。
將培養懸浮液快速轉移到滅菌小瓶中。 每瓶約增加1.5 mL。 用橡皮帽密封。
通過將小瓶置於-20攝氏度的冷凍箱中來冷凍小瓶內的培養懸浮液。
一旦培養物冷凍,通過開啟冷凍乾燥機並準備適當的溫度和真空條件以保持穩定。 根據製造商對您使用的特定品牌的冷凍乾燥機的說明進行操作。
小心地和無菌地將小瓶蓋鬆散地放在小瓶頂部,以便在冷凍乾燥過程中水分可以逸出,並將小瓶放入冷凍乾燥室中。 根據製造商的說明將真空施加到腔室。
讓培養時間完全凍乾(乾燥)。 根據每個樣品的體積和您擁有的樣品數量,這可能需要幾個小時甚至一夜之間。
根據製造商的說明從冷凍乾燥室中取出樣品,立即用橡皮帽密封小瓶,然後將瓶蓋密封。
將凍乾的培養物收集物在室溫下保存。
你需要的產品
- 冷凍乾燥機
- 營養素或其他適當的瓊脂平板(和培養箱培養)
- 玻璃棒
- 凍乾緩衝液
- 帶橡膠塞的壓接式小瓶(以及用於蓋帽的壓接器)
- 冰箱
參考:
SP Scientific。 冷凍乾燥的基本原理。 http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/